Анализ на гистологию

Гистологическая классификация стадий рака

Помимо классификации TNM, существует классификация по гистологическим особенностям опухоли. Её называют степенью злокачественности (Grade, G). Этот признак указывает, насколько опухоль активна и агрессивна. Степень опухолевой злокачественности указывают следующим образом:

GX — степень дифференцировки опухоли не может быть определена (мало данных);

G1 — высокодифференцированная опухоль (неагрессивная);

G2 — умеренно дифференцированная опухоль (умеренно-агрессивная);

G3 — низкодифференцированная опухоль (высокоагрессивная);

G4 — недифференцированная опухоль (высокоагрессивная);

Принцип очень простой — чем выше цифра, тем агрессивнее и активнее ведет себя опухоль. В последнее время степени G3 и G4 принято объединять в G3-4, и называют это «низкодифференцированная — недифференцированная опухоль».

В классификациях сарком костей и мягких тканей вместо степеней G просто используются термины «высокая степень злокачественности» и «низкая степень злокачественности». Особые системы оценки степени злокачественности разработаны для опухолей молочной железы, они определяются с помощью показателей в результате иммуногистохимического исследования.

Процедура диагностики

Зачастую при всех случаях онкологии проводят одни и те же исследования. Мы постараемся объяснить насколько важна гистология.

1. Возможный пациент приходит с жалобами к врачу или это может быть плановый осмотр.
2. Доктор проводит пальпацию, осмотр и опрашивает пациента.
3. Если есть подозрения на рак, то его направляют сдавать анализы — общий и биохимический анализ крови и кал.
4. При наличии отклонений в анализах пациента направляют к врачу-онкологу.
5. Делается рентгенография, УЗИ брюшной полости.
6. Если у пациента присутствует чёткая симптоматика, то начинается диагностика определенного органа.
7. В случае присутствия ярко выраженной опухоли, делают забор.
8. И уже тут проводят биопсию и отправляют кусок ткани на гистологию.
9. После могут провести КТ или МРТ. Это необходимо для выяснения степени инвазии — насколько раковая опухоль поражает здоровые ближайшие клетки и ткани.

Только после проведения тщательной диагностики, врач строит окончательный диагноз и придумывает стратегию для борьбы с недугом.

Методы гистологических исследований

На сегодняшний день существует ряд методов, позволяющих изучить различные аспекты жизнедеятельности клеток исследуемой ткани:

– оптическая микроскопия, т.е. осмотр тканевых срезов при помощи обычного микроскопа в естественном либо искусственном видимом свете;

– темнопольная микроскопия, т.е. изучение образца в наклонном световом луче;

– фазово-контрастное исследование;

– люминесцентное и флуоресцентное микроскопическое исследование с окрашиванием образца специальными веществами;

– интерференционное исследование при помощи специального интерференционного микроскопа, облегчающего количественную оценку ткани;

– изучение при помощи электронного микроскопа;

– исследование образцов в ультрафиолетовом свете;

– исследование в поляризованном свете;

– радиоавтографическое исследование;

– цитоспектрофотометрическое исследование;

– применение иммуноцитохимических методик;

– метод культуры клеток;

– микрохирургическое исследование.

Совокупность нескольких методов даёт достаточно полную картину состояния обследуемого органа, что позволяет точно диагностировать заболевание и назначить соразмерное лечение

Это особенно важно при подозрении на онкологическое заболевание, когда от своевременности начала лечения нередко зависит жизнь больного

Что показывает гистология?

С помощью гистологического исследования врач имеет возможность рассмотреть кусочек ткани или органа на клеточном уровне. Это позволяет выявить такие процессы, как:

• воспаление, острое или хроническое;
• наличие кровоизлияний, тромбов, инфарктов и других расстройств кровообращения;
• наличие новообразований, определить их отношение к доброкачественным или злокачественным образованиям, а также определить степень злокачественности при обнаружении раковой опухоли.

Также при микроскопии можно обнаружить инородные тела, колонии бактерий или грибковой инфекции, паразитов и т. д. И это далеко не полный список возможностей гистологии.

Широко используется гистология в гинекологии. Обязательному исследованию подлежит плацента после родов или самопроизвольных абортов, соскобы полости матки после замершей беременности, выкидышей, что помогает найти причину неудачных беременностей и подобрать адекватное лечение.

Проводят исследования соскоба полости матки с целью определения изменений функционального слоя эндометрия в разные дни менструального цикла

Полученные данные позволяют судить о работе яичников, что является важной информацией для лечения, например, бесплодия у женщины

Гистология шейки матки выявляет наличие воспалений, доброкачественных или злокачественных опухолей. Для этого исследования от шейки матки отщипывается маленький кусочек тканей и отправляется в лабораторию. Такой метод исследования позволяет выявить рак на ранних стадиях, а также изменения эпителия, именующееся в медицине как предрак – пограничное состояние, еще не опухоль, но может в любой момент ею стать.

Своевременное гистологическое исследование помогает выявлять заболевания на ранних стадиях, когда консервативные методы лечения еще могут помочь.

Основные типы тканей.

Гистологи обычно различают у человека и высших животных четыре основных ткани: эпителиальную, мышечную, соединительную (включая кровь) и нервную. В одних тканях клетки имеют примерно одинаковую форму и размеры и так плотно прилегают одна к другой, что между ними не остается или почти на остается межклеточного пространства; такие ткани покрывают наружную поверхность тела и выстилают его внутренние полости. В других тканях (костной, хрящевой) клетки расположены не так плотно и окружены межклеточным веществом (матриксом), которое они продуцируют. От клеток нервной ткани (нейронов), образующих головной и спинной мозг, отходят длинные отростки, заканчивающиеся очень далеко от тела клетки, например в местах контакта с мышечными клетками. Таким образом, каждую ткань можно отличить от других по характеру расположения клеток. Некоторым тканям присуще синцитиальное строение, при котором цитоплазматические отростки одной клетки переходят в аналогичные отростки соседних клеток; такое строение наблюдается в зародышевой мезенхиме, рыхлой соединительной ткани, ретикулярной ткани, а также может возникнуть при некоторых заболеваниях.

Многие органы состоят из тканей нескольких типов, которые можно распознать по характерному микроскопическому строению. Ниже дается описание основных типов тканей, встречающихся у всех позвоночных животных. У беспозвоночных, за исключением губок и кишечнополостных, тоже имеются специализированные ткани, аналогичные эпителиальной, мышечной, соединительной и нервной тканям позвоночных.

Дифференциальная диагностика инвазивной крибриформной карциномы молочной железы

Дифференциальный диагноз ИКК:

1. коллагенозный сферулез;
2. крибриформная протоковая карцинома in situ (DCIS);
3. аденоидно-кистозная карцинома
4. карциноидная опухоль.

Важно распознать этот спектр гистоморфологии и дифференциальной диагностики, поскольку доброкачественные заболевания молочной железы или другие инвазивные виды рака молочной железы также могут демонстрировать крибриформную картину

1. Коллагенозный сферулез – это доброкачественное заболевание гиперплазии молочной железы, обнаруживаются часто случайно и демонстрируют редкие случаи опухолевого образования, тогда как при ИКК опухоль можно увидеть невооруженным глазом. Характерными признаками внутриполостного коллагенового сферулеза являются прозрачные, содержащие бесклеточные эозинофильные коллагеновые глобулы или мелкие аморфные вещества. Эти внутриполостные отложения состоят из компонентов базальной мембраны (коллаген IV типа и ламинин), причем матрикс и ядро эпителиальных клеток не имеют атипии. Эозинофильные коллагеновые глобулы окружены мышечным эпителием. В отличие от этого, ИКК или инвазивная крибриформная карцинома имеет островковидный рисунок инфильтрации, с отсутствием миоэпителия вокруг гнезда рака, а ядра имеют легкую или умеренную аномалию. 
2. Еще одним патологическим подражанием ИКК является протоковая карцинома in situ (DCIS), которая относится к неинвазивным ракам. Она имеет гладкий круговой контур с миоэпителиальными клетками, окружающими канальцы, и отсутствием волокнистой реакции вокруг стромы. С другой стороны, ИКК имеет неправильную островковидную инфильтрационную картину или угловую инфильтрационную картину. Окружающий образование миоэпителий отсутствует.
3. Кроме того, аденоидно-кистозная карцинома молочной железы также является одним из дифференциальных диагнозов. Она состоит из двухклеточной популяции внутренних люминальных клеток и наружных миоэпителиально-базальных клеток. Истинные просветы железы выстланы протоковыми эпителиоцитами (EMA+, кератин+, CD117+). Применяется окрашивание альциановым синим, окрашивание PAS.  Антитела Виментин+, Р63+, Кальпонин+. Несмотря на то, что крибриформная карцинома имеет сходную морфологию, в отличие от аденоидно-кистозной, она имеет только один тип клеток, с исчезновением базальных миоэпителиальных клеток. Кроме того, рецепторы ER и PR при аденоидно-кистозной обычно отрицательны, по сравнению с ИКК. Кроме того, она обычно не имеет компонента DCIS, в то время как ИКК часто из них состоит. 
4. Поскольку крибриформный паттерн также можно наблюдать при нейроэндокринных опухолях, поэтому также необходима дифференциальная диагностика нейроэндокринного рака молочной железы. В цитоплазме нейроэндокринных опухолей  можно обнаружить эозинофильные гранулы, Также обнаруживаются положительные нейроэндокринные маркеры CD56, CgA и Syn. Это облегчает дифференцировку нейроэндокринных опухолей с крибриформной карциномой, так как они отрицательно реагирует на эти маркеры. 

Протоковая карцинома in situ

Коллагенозный сферулез

Аденоидно-кистозная карцинома молочной железы

Кроме выше перечисленных, необходимо учитывать возможность метастазирования крибриформного узора из других мест, таких как слюнная железа, толстая кишка, предстательная железа, матка или яичники. В целом эти метастазы присутствуют с высокой степенью клеточной морфологии, а иммуногистохимия (например, CK20, CDX-2, PSA и PAX-8) полезна для дифференциальной диагностики метастазирования и определения места происхождения. 

Культура ткани.

Изолированные кусочки тканей или органов помещают в питательные растворы в условиях, исключающих возможность заражения микробами. В этой необычной среде ткани продолжают расти, проявляя многие особенности (такие, как потребность в питательных веществах, кислороде, определенном пространстве и т.п.), характерные для них в нормальных условиях, т.е. когда они находятся в живом организме. Культивируемые ткани могут сохранять и многие из своих структурных и функциональных признаков: фрагменты сердечной мышцы продолжают ритмически сокращаться, кожа зародыша продолжает расти и дифференцируется в обычном направлении. Однако иногда культивирование выявляет такие свойства ткани, которые у нее в обычных условиях не выражены и могли бы остаться неизвестными. Так, изучая строение клеток аномальных новообразований (опухолей), не всегда удается установить их принадлежность к той или иной ткани или их эмбриональное происхождение. Однако при выращивании в искусственной питательной среде они приобретают черты, характерные для клеток определенной ткани или органа. Это может оказаться чрезвычайно полезным не только для правильной идентификации опухоли, но и для установления органа, в котором она первоначально возникла. Некоторые клетки, например фибробласты (клетки соединительной ткани), очень легко поддаются культивированию, что делает их ценными экспериментальными объектами, в частности в тех случаях, когда необходим однородный материал для испытания новых лекарственных препаратов.

Выращивание тканевой культуры требует определенных навыков и оборудования, однако это важнейший метод изучения живых тканей. Кроме того, он позволяет получить дополнительные данные о состоянии тканей, изучавшихся обычными гистологическими методами.

Вы здесь

Главная » Основные принципы организации клиники терапевтической стоматологии » Методы обследования в клинике терапевтической стоматологии » Методы и средства диагностики

Гистологический и цитологический методы исследования

Гистологический и цитологический методы исследования. Для уточнения диагноза и определения характера патологического процесса предпринимают гистологическое исследование. Прибегают к этому методу в тех случаях когда диагноз, а следовательно, и лечение не могут быть определены без предварительного исследования. Биопсию производят под местным обезболиванием. При этом иссекают часть или весь измененный участок вместе с зоной прилежащей неизмененной ткани. Результаты исследования сообщаются при необходимости через 15—20 мин (экспресс-биопсия) или спустя некоторое время, когда будут закончены все исследования (7—10 сут —для мягких тканей).

Следует указать, что гистологическому исследованию в обязательном порядке подлежат любые хирургически иссеченные ткани (в том числе удаленные зубы с прилежащими фрагментами ткани периодонта). Материал для исследования с соответствующим образом оформленным сопроводительным документом направляют в патологоанатомическую лабораторию или отделение.

При наличии в тканях полости рта, лица или шеи инфильтратов необходимо производить диагностическую пункцию.

Другим важным морфологическим методом является цитологическое исследование, которое позволяет по характеру обнаруженных клеток определить природу патологического процесса (злокачественность), состояние тканей при том или ином заболевании, выявить их иммунобиологическую и неспецифическую реактивность. Наличие определенных клеток позволяет быстро уточнить диагноз. Например, выявление акантолитических клеток свидетельствует о пузырчатке. Цитологический метод в настоящее время стал серьезным подспорьем в диагностике многих заболеваний слизистой оболочки полости рта.

Цитологическое исследование слизистой оболочки проводят в день осмотра больного. Больной должен прополоскать рот водой, после чего у него берут материал для исследования. Взятие материала производят четырьмя способами.

Первый способ (по Покровскому и Маркову). Предметное стекло после обработки спиртом и высушивания прикладывают к исследуемому участку слизистой оболочки. Производят несколько отпечатков с пораженного места и других участков слизистой оболочки полости рта.

Второй способ. Мазок с исследуемого места берут и переносят на предметное стекло с помощью предварительно прокипяченной ученической резинки.

Третий способ (по Ясиновскому). Больной прополаскивает 2—3 раза полость рта физиологическим раствором. Жидкость собирают в пробирки и центрифугируют. Затем каплю содержимого помещают на предметное стекло и под микроскопом определяют состав и количество клеток.

Четвертый способ. Забор материала для исследования путем соскоба. Этот способ применяют при наличии язв, когда трудно взять мазок. Добытый материал наносят на предметное стекло, препарат высушивают на воздухе и фиксируют в чистом спирте. Способ окраски зависит от предполагаемого диагноза. Иногда приходится применять специальные окраски для выявления опухоли, юных клеток крови, туберкулезного поражения тканей и др. Имеется много модификаций окраски мазков для определения характера опухолевого процесса.

Результаты морфологического исследования должны сопоставляться с другими диагностическими данными.

Из других методов исследования, которые должны применяться при обследовании каждого больного, в первую очередь следует назвать определение pH среды ротовой полости. При этом лакмусовую бумагу смачивают ротовой жидкостью и сравнивают окраску со стандартной таблицей

Результаты имеют важное значение для последующего лечения. При pH ниже 6,0 следует назначать щелочные, выше 7,0—кислые полоскания

Что искать?

Ищите то, что вам нужно в конкретный момент для полноты картины. Образ гистологической структуры или процесса у вас в голове — будто паззл. После первого ознакомления с темой и запоминания основных терминов и понятий у вас есть большая часть элементов, но они не связаны между собой. К примеру, вы уже знаете, что в печеночной дольке есть балки гепатоцитов, синусоиды и внутридольковые желчные протоки, но слабо представляете, каким образом они связаны друг с другом. Теперь вам нужно сопоставить все элементы мозаики в логичную и целостную картину

Анализируйте, чего не хватает вашей картине для целостности и ищите это — не важно, в области какой дисциплины. Как только картина начнет складываться так, что из любого ее конца вы мысленно дойдете в другой — ваш образ гистологической структуры или процесса готов

По ходу изучения дисциплины картины отдельных структур и процессов соединяются все теснее и теснее, и вот уже вся дисциплина слилась в целостную, подчиненную некой внутренней логике картину — вот идеал, к которому вы должны стремиться.

Гистология, что это такое в онкологии

Диагностика онкологических заболеваний невозможна без проведения гистологического анализа. На данный момент это наиболее точный и надежный метод, представляющий собой, в широком смысле слова, анализ образца тканей, взятых из новообразования.

Что представляет собой гистология

Гистологический анализ в онкологии – это исследование клеток ткани под микроскопом, которое позволяет определить тип и характер новообразования по специфическим особенностям клеточной организации.

Это наиболее надежный метод исследования, обеспечивающий практически стопроцентную точность.

Область его применения достаточно широка: это не только определение онкологических заболеваний, но и анализ иных новообразований, выявление скрытых воспалительных процессов в тканях и многое другое.

В каких случаях назначают гистологическое исследование

В онкологии гистологические исследование тканей назначается при подозрении на наличие злокачественного изменения тканей.

Поводов для проведения такого анализа немало – изменившаяся родинка, подозрительное образование на коже, внезапно увеличившиеся лимфоузлы, уплотнения в тканях и органах (например, в щитовидной железе).

Также гистологический анализ обязательно проводится после полостных операций.

Как проводится гистология

Прежде всего для исследования необходимо взять образец ткани. Форма взятия образца на анализ различается в зависимости от органа, который необходимо обследовать – это может быть мазок, отпечаток, срез и так далее. Чаще всего для гистологического исследования в онкологии используется срез тканей исследуемого новообразования.

Для исследования используются крайне тонкие срезы толщиной буквально в несколько клеток. Чтобы облегчить визуализацию внутриклеточных изменений, препараты окрашиваются специальными красителями.

Чаще всего для этих целей используются эозин и гематоксилин. Красители воздействуют на определенные вещества в составе клеток, изменяя их цвет: так, к примеру, гепатоксилин окрашивает белки в красный цвет, а нуклеиновые кислоты – в синий.

Таким образом все изменения внутри клеток становятся наглядными.

Затем полученный окрашенный срез изучается и сравнивается с другими образцами из международной электронной опухолевой базы. Существует множество разновидностей злокачественных опухолей, и у каждой из них свой неповторимый «рисунок».

Для этого и существует обширная база, где в оцифрованном виде хранятся срезы различных типов новообразований, с которыми врачи могут сравнивать полученные данные гистологического анализа.

Важно: результат гистологического анализа во многом зависит от квалификации и опыта врача. Поэтому при расшифровке результатов анализа возможны ошибки – неправильная обработка, неверные расшифровки и тому подобное

Поэтому для надежности необходимо получить заключение минимум двух специалистов, а также пройти дополнительные исследования (например, иммуногистохимию).

Срез для исследования получают следующим образом. Сначала образец ткани специальным образом подготавливают – пропитывают жидким парафином, после чего помещают в специальную форму и заливают парафином полностью, получая в результате плотный парафиновый блок с заключенным внутри кусочком ткани. Это позволяет надолго сохранить образец и облегчить его дальнейшую обработку.

Таким образом, на стекле остается тончайший слой окрашенных клеток. Предметное стекло с образцом накрывается сверху более тонким покровным стеклом и сохраняется в таком виде для дальнейшего изучения.

Подобный препарат называется гистологическим стеклом.

Парафиновые блоки и гистологические стекла хранятся у лечащего врача на протяжении всего времени терапии.

Образцы тканей необходимы при уточнении диагноза и отслеживании динамики заболевания.

Это вполне возможно, если соблюдать определенные правила хранения препаратов – в сухом темном месте, при температуре не выше 25 градусов, не допуская попадания на препарат солнечных лучей.

Гистологический анализ – самый современный и надежный метод диагностики онкологических заболеваний. Только по его результатам возможно поставить точный диагноз.

Однако даже во время проведения этого исследования не исключены ошибки – поэтому для максимально точного результата не следует пренебрегать дополнительными обследованиями.

Как проводят гистологию?

Выяснив значение термина гистология, что это за исследование такое – пациенты хотят знать особенности его проведения. Когда проводится гистология, анализ образца поврежденной ткани осуществляется в несколько этапов. Изначально врачи производят забор материала для исследования и помещают его в специальный раствор. Затем образец для исследования доставляют в лабораторию. Под микроскопом с большим увеличением врачи изучают имеющиеся отклонения от нормы, устанавливают характер и стадию патологического процесса.

Забор материала для гистологического исследования

Гистология опухоли, точнее, забор образца материала для исследования, производится зачастую во время оперативного вмешательства. В отдельных случаях может назначаться отдельная процедура (выскабливание полости матки, например), при которой забирается участок поврежденной ткани для дальнейшего анализа. С помощью хирургического инструмента иссекается небольшой кусочек ткани, помещается в специальную стерильную емкость, пробирку.

Частой процедурой подобного рода является биопсия эндометрия в гинекологии. Такого типа гистология (что это такое – описано выше) может проводиться несколькими способами:

1. С использованием микрокюретки – несколькими штриховыми движениями вдоль маточной стенки забирают материал.
2. Пайпель-метод – специальной гибкой трубкой материал под действием вакуума извлекается из органа.
3. Вакуум-аспирация – ткань забирают, используя вакуумный отсос.

Гистологическое исследование материала

Гистологическое исследование биопсийного материала проводят в несколько этапов. Последовательность процедуры по исследованию образца ткани выглядит так:

1. Забранный участок ткани фиксируют специальным раствором.
2. Проводят обезвоживание ткани для придания ей плотной консистенции.
3. Производят пропитку ткани заливочным препаратом (парафином) для получения твердого блока.
4. Полученный блок, используя микротом, нарезают на мелкие пластинки.
5. Полученные срезы помещают на предметные стекла и окрашивают раствором.
6. Окрашенные срезы микроскопируют с помощью электронного микроскопа, изучая структуру и особенности строения ткани.

Гистологическое исследование – расшифровка показателей

Результаты гистологии объективно могут быть оценены только специалистом. На основании клинических проявлений и состояния пациента врачи выставляют окончательный диагноз, учитывая результаты гистологического исследования

При макроскопической оценке врачи принимают во внимание:

• размер исследуемого материала;
• цвет, плотность и консистенцию ткани;
• патологические изменения (размягчение, замещение, пролиферация).

Микроскопия проводится с целью подробного анализа среза ткани, для выявления атипичного роста ее клеток, нарушения их структуры. В результате подробно описываются наблюдаемые отклонения, пораженные структуры ткани: состояние ядерных структур, основных клеточных органелл. При невозможности выставления диагноза специалисты ограничиваются перечислением наблюдаемых изменений.

Что такое гистология?

Открыв любой медицинский справочник, мы без труда узнаем, что гистологией называют медицинскую дисциплину, которая занимается исследованиями тканей человеческого тела и организмов животных, их изменениями, наступающими в ходе болезней, а также воздействия различных препаратов и химических соединений. Тело человека состоит из пяти основных типов тканей:

– мышечной;

– соединительной;

– эпителиальной (покровной);

– нервной;

– крови.

У каждой из этих тканей имеются характерные лишь для неё особенности строения, жизнедеятельности, обмена веществ на клеточном и межклеточном уровне. Зная нормальное состояние тканей и признаки патологических изменений, легко диагностировать болезни, которые никак не проявляют себя на ранних стадиях – например, начальные фазы онкологического заболевания.

Чтобы провести гистологическое исследование, необходимо взять образец интересующей врача ткани хирургическим способом, методом биопсии либо аутопсии. Эту науку нередко называют клеточной анатомией, так как она изучает строение клеток разных видов тканей.