Пцр диагностика в гинекологии

Материал для исследования и правила его забора

Для лабораторного ПЦР-исследования используют различный биоматериал в зависимости от предполагаемого заболевания. Подробнее о материалах и правилах забора, смотрите таблицу ниже.

Особенности подготовки к ПЦР исследованию

Как отмечают доктора, эффективность анализа базируется не только на том, откуда берется материал для исследования.

Важно также правильно подготовить пациента к сбору образцов. Иначе итог также может получиться совсем не тем, которого ожидаешь

Подготовка к мазку на ПЦР с половых органов не представляет сложностей. Необходимо:

• отказаться от спринцевания и других вариантов антисептической обработки половых органов;
• накануне исследования ограничиться простым подмыванием с помощью проточной воды;
• не использовать для обработки гениталий мыло или иные средства гигиенического толка;
• не мочиться непосредственно перед забором образцов в течение нескольких часов;
• исключить минимум на сутки половые контакты;
• постараться соблюсти простую диету, исключая вредную пищу, алкоголь.

Если образцы требуется забрать из какой-либо иной зоны, подготовка будет разниться. Так, например, если областью забора материала служит ротовая полость, придется отказаться от утренней чистки зубов. Нужно постараться не принимать пищу непосредственно перед исследованием.

С областью ануса – проще. Стоит просто отказаться от антисептической обработки проблемной зоны.

ПЦР диагностика инфекций

Мазок ПЦР у женщин, что это такое, для чего берется и по каким правилам? Данное исследование позволяет очень точно выявить возбудителей различных инфекций и виновников воспалительных процессов (вульвовагинитов). Берется ПЦР анализ у живущих половой жизнью и никогда не обследовавшихся, планирующих беременность, имевших незащищенные половые контакты, мазок сдают и женщины, и мужчины.

Полимеразная цепная реакция, именно так расшифровывается ПЦР, дает возможность в небольшом количестве взятого на анализ материала найти генетическую информацию инфекционного возбудителя. Самым распространенным является мазок методом ПЦР на ИППП (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы), кстати, эти же инфекции относятся к разряду «скрытых», не дающих явной симптоматики и не выявляющихся при обычных, рядовых исследованиях. Часто проводится диагностика герпетических инфекций, а также различных типов папилломавирусной инфекции

При этом особое внимание уделяется тем типам, которые вызывают рак шейки матки, то есть онкогенным

Мазок ПЦР на хламидии и другие инфекции берут у будущих мам, если те во время планирования ребенка его не сдавали. Данное исследование обязательно необходимо, так как скрытые инфекции, передающиеся половым путем, могут много лет «сидеть» в организме, никак себя не проявляя, но очень навредят будущему ребенку, могут привести к выкидышу, преждевременным родам, внутриутробной инфекции, а вследствие этого гибели плода. Конечно, лучше проводить лечение на этапе планирования ребенка, но если ПЦР диагностика инфекций их обнаружила уже после зачатия — не беда, есть современные безопасные препараты, которые можно принимать будущим мамам.

Многие женщины боятся сдавать анализы, наслушавшись и начитавшись о том, что любые манипуляции «там» врача могут спровоцировать выкидыш. А тем более нельзя сдавать мазок ПЦР при беременности, так как материал берется из шейки матки, а не с ее поверхности. Но это не страшно. Длина шейки матки немаленькая. Инструмент не попадет в матку, никак не затронет ребенка. И шейку расширять для взятия биоматериала не нужно. Мазок из цервикального канала безопасен для матери и ребенка и безболезненен.

Делается данное исследование не только с целью обнаружения инфекций, передающихся половым путем, но и возбудителей бактериального вагиноза и кандидоза — гарднерелл и грибов рода Кандида. Так что, расшифровка мазка на ПЦР диагностику бывает полезна и в таких «банальных» случаях.

Чтобы получить точный результат анализа, нужно соблюдать несколько простых правил перед его сдачей. Подготовка к мазку на ПЦР очень проста.

1. Нельзя мочиться за 3 часа до сдачи анализа.

2. Исследование проводится вне приема антибиотиков и антибактериальных средств.

3. Лучше сдавать мазок в середине цикла, но не перед самым началом менструации или сразу после завершения.

4. За 2-3 суток до исследования не использовать местных средств контрацепции и вагинальных препаратов.

5. В течение нескольких часов до сдачи мазка нельзя подмываться и спринцеваться.

6. Половую жизнь нужно прекратить минимум за 1,5 суток до взятия материала.

7. Сдачу мазка следует немного отложить, если накануне были взяты кольпоскопические пробы для выявления заболеваний шейки матки.

Сдача мазка

При первичном осмотре женщины в консультации или платной клинике существуют несколько распространенных методов лабораторного исследования полученного материала. Обычно на приеме или при профосмотре врачи рекомендуют для сдачи три вида мазков на половые инфекции:

1. бактериологический посев,
2. ПЦР анализ на «скрытые инфекции» и
3. микроскопия (т.н. «мазок на флору»).

Кроме этих есть такие методики, как флороценоз, НАСБА, цитоскрининг. В данном материале мы рассмотрим последний метод лабораторной диагностики, т.е. простой «мазок на инфекции», который чаще всего сдают на приеме и осмотре у гинеколога для начальной диагностики.
 

Сдать мазок на инфекции женщины и девушки могут из следующих мест:

Подготовка к сдаче

1-2 суток перед визитом к врачу следует воздержаться от половых контактов;
Перед сдачей мазка на половые инфекции рекомендуется не мочиться в течение 2 часов.
Накануне анализа рекомендуется провести провокацию. Надежным методом считается алиментарная провокация (алкоголь + соленое, острое).
Если есть такая возможность, девушкам желательно сдавать мазок на ИППП перед или после месячных.
 

Как берут мазок на инфекцию

Взятие мазка на инфекции у женщин проводится гинекологом в смотровом кабинете на гинекологическом кресле. Во влагалище врач вводит специальный медицинский инструмент, т.н.»зеркало» и осуществляет взятие материала (выделений) из всех предполагаемых очагов с помощью одноразового шпателя — зондика. Он представляет собой пластмассовую палочку с расширенным концом, которым, делая мазки, гинеколог равномерно распределяет взятый материал по специальному чистому предметному стеклу.

На какие инфекции сдают мазок

Покажет ли мазок инфекцию? Хороший результат женского мазка (т.е. их не обнаружение) нельзя считать абсолютно достоверным, особенно при наличии определенных жалоб. Объясняется это рядом объективных моментов, влияющих на его результат. В ситуациях, когда признаки воспаления налицо, но причина его по результатам обычных мазков на инфекции не ясна, гинекологи могут прибегнуть к дополнительным методам — ПЦР-диагностике, бакпосеву.

Почему результатов мазка на инфекции бывает недостаточно для точной диагностики ЗППП:

Вирусные, хламидийные, микоплазменные и уреаплазменные инфекции практически не определяются в урогенитальном мазке на инфекции. Вирусы, хламидии, уреаплазмы и микоплазмы представляют собой микроорганизмы очень малых размеров, которые сложно заметить под микроскопом при обычном анализе мазка. Для диагностики инфекций в этих случаях существуют другие, более информативные методы (мазок ПЦР, ИФА-диагностика).

Обнаруженный грибок в мазке на инфекции — верный симптом молочницы. Но кандидоз может быть сопутствующим заболеванием, развившемся на фоне более серьезной половой инфекции (ИППП).

Повышенные лейкоциты при микроскопии мазка на инфекции могут быть следствием ошибочной диагностики, при случайном попадании в мазок при взятии гноя. Лейкоцитоз помешает врачу-лаборанту «увидеть» возбудителя.

Во многих случаях влагалищный мазок на инфекции позволяет выявить инфекцию, но не «природу» (возбудителя) этой инфекции и, что не менее важно, с помощью мазка не возможно выяснить чувствительность этих возбудителей к определенным антибиотикам. Эту проблему можно решить проведением бактериологического посева.
 

Цены на услуги

Базовые лабораторные исследования женских выделений, ₽

Сдача мазка на инфекции

Взятие материала у женщин для анализа мазка на инфекцию гинекологи проводят ежедневно. Используются только одноразовые инструменты и расходные материалы. У девочек и девушек-девственниц зеркало при этой процедуре не применяется! Приглашаем к специалистам нашей клиники в Москве! Также возможная сдача анализов мужчинам (мазок, ПЦР, посев и анализы крови).

Покажет ли ЗППП мазок на флору

Все пациенты, обратившиеся к венерологу, сдают мазок на флору. Это когда врач берет отделяемое уретры или влагалища, а затем исследует его под микроскопом. Это исследование простое, быстрое, недорогое, но в то же время информативное. Оно дает врачу множество информации.

В первую очередь такой мазок необходим для того, чтобы понять, присутствует ли воспалительный процесс в урогенитальном тракте. Узнать это можно по количеству лейкоцитов. Это клетки иммунной системы. Если их слишком много, это говорит об активной инфекции.

При этом врач не может знать, какое именно заболевание поразило человека. Потому что большинство возбудителей ЗППП микроскопическим методом не выявляются. Но некоторые бактерии, грибы и простейшие могут быть обнаружены.

При помощи мазка на флору диагностируют:

• трихомониаз (обычно выявляется у женщин во влагалище)
• гонорею (чаще гонококки обнаруживаются у мужчин в уретре)
• кандиды

Могут быть обнаружены признаки пребывания хламидий в мочеполовой системе. Но их выявление не является основанием для установления соответствующего диагноза.

Где сдать анализ и через сколько можно получить результаты

Что касается того, где сдать ПЦР, то сегодня есть возможность это сделать в любой частной клинике или лаборатории. В любом случае врач, который направит на анализ, подскажет, куда лучше обратиться. Что касается готовности результата, то его можно будет забрать через пару дней. Во многих случаях пациент получает «бумагу»  в тот же день.

Расшифровка результатов

Есть несколько видов расшифровки, в зависимости от получаемого результата.

А именно:

• Отрицательный результат. Он говорит о том, что на момент сдачи анализа в исследываемом материале не было замечено никаких инфекционных составляющих. В подавляющем большинстве случаев анализ именно такой.
• Положительный результат. Если будет указано подобное, то можно с большой точностью сказать о том, что в исходном материале найдены следы определённых инфекций.

ПЦР тест

Иногда у людей обнаруживается так называемое «здоровое носительство». Это происходит тогда, когда человек чувствует себя хорошо, у него нет никаких симптомов, которые бы указывали на наличие инфекции, а анализ говорит об обратном. Такое бывает, когда сдаётся ПЦР на ИППП, на герпес, ВЭБ-инфекцию, ЦМВИ, ВПЧ и т.д.

Нужно понимать, что все инфекции разные, одни требуют незамедлительного лечения, за другими необходимо только наблюдать. Решение, что делать дальше в этом случае должен принимать исключительно доктор. Специалист же на основе результатов поставит диагноз и назначит лечение, если оно требуется.

Что касается того, насколько точен анализ ПЦР, то для этого используют такие определения:

• Максимальная точность (диагностика позволяет выявить наличие инфекции или «сообщить» об её отсутствии практически со 100% точностью).
• Специфичность (выявление именно конкретной инфекции).
• Чувствительность (даже если исследуемого материала мало, выявить возбудителя, в случае когда он есть, не составит труда).

Согласно исследованиям, ПЦР практически никогда не выдаёт неправдивых результатов. То есть, если инфекции нет, то и положительной пробы не будет. Крайне редко подобное бывает с хронической инфекцией, которая находится в неактивной фазе. В этом случае полимеразная цепная реакция может быть положительной.

Сравнение мазка с анализами крови на ЗППП

Анализы крови не используются для обнаружения большинства ЗППП.

Они лишь уточняют течение заболевания: определяют его давность, помогают проконтролировать эффективность лечения.

Исключение составляет сифилис.

Он в определенные периоды протекает в скрытой форме.

Если на теле человека нет эрозий или высыпаний, то прямое обнаружение бледной спирохеты невозможно, потому что врачу попросту неоткуда взять мазок.

Тогда он берет на анализ кровь и отправляет в лабораторию, где выявляются антитела к возбудителю сифилиса.

Так как это непрямой метод обнаружения бактерий, требуется минимум 2 разных положительных теста, чтобы врач мог подтвердить диагноз.

Анализ методом ПЦР

ПЦР анализ — что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

• инфекционный мононуклеоз;
• ВИЧ;
• цитомегаловирусную инфекцию;
• вирусные гепатиты G, C, B, A;
• инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
• герпетическую инфекцию;
• онкогенные вирусы;
• листериоз;
• хеликобактерную инфекцию;
• клещевой энцефалит, боррелиоз;
• туберкулез;
• кандидоз.

Крови

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

Мазка

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины. Для проведения анализа могут быть взяты разные биологические жидкости: слюна, мокрота, моча, кровь. В гинекологии для точности определения чаще используется мазок со слизистой влагалища из цервикального канала.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

• беременность, которая протекает тяжело;
• острая фаза ИППП;
• если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
• поиск причин бесплодия.

Кала­

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

• за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
• исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

1. Анализ способен указывать на ДНК паразита, другие же тесты могут определять только остатки их жизнедеятельности.
2. Высокая точность, будет установлен возбудитель.
3. Ультрачувствительный анализ, который способен выявить даже одну клетку вируса.
4. Результат исследования ПЦР будет готов через 4-5 часов.

Мочи

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

• минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
• за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
• сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
• брать нужно первую утреннюю порцию материала.

ПЦР-диагностика – что это такое в гинекологии

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция и представляет собой высокоточный метод исследования биологического материала. Этот метод молекулярной биохимии был разработан относительно недавно (в 1983 году) американским учёным Кэри Муллисом, за что в 1996 году он был удостоен Нобелевской премии. Основа для научных изысканий в этом направлении была заложена ещё раньше – в 70-е годы прошлого века. Тогда норвежские исследователи изобрели способ копирования молекул ДНК. Заслуга Муллиса в том, что он доработал эту методику, сделав возможным воспроизводство исходной молекулы любого генетического материала путём воздействия на него ферментом ДНК-полимеразой.

Данный вид диагностики разительно отличается от прочих методов. В условиях лаборатории производится копирование участка дезоксирибонуклеиновой кислоты конкретного патогена. Однако реакция запускается только в случае обнаружения искомого ДНК в исследуемом материале. Именно таким образом выявляется наличие того или иного типа возбудителя инфекции. Создание копии ДНК в условиях лаборатории напоминает аналогичный процесс в живом организме с той разницей, что в естественной среде производится полный образец, а в лабораторной – лишь его короткий сегмент. Так, если в теле человека длина оснований составляет более 3 миллиарда пар, то копируемых насчитывается около трёх тысяч.

ПЦР-анализ активно применяется в гинекологии, так как позволяет выявить виновников воспалительных процессов различного происхождения в женском организме. Он назначается всем – беременным, женщинам, ведущим половую жизнь, молодым девушкам или пациенткам, готовящимся к менопаузе

ПЦР является важной частью любого гинекологического исследования

Показания к назначению

ПЦР-анализ позволяет определить в исследуемом материале возбудителей ИППП (инфекций, передающихся половым путём). К этой группе относят ВИЧ-инфекцию, хламидии, гонококки, трихомонады, микоплазмы и другие. Это те патогены, которые могут попасть в организм женщины при незащищённом половом контакте. Их лечение обязательно, так как даже если инфекционный агент никак себя не проявляет, он может привести к воспалению и более опасным последствиям.

Кроме упомянутых, в исследуемом материале выявляют ДНК-следы многих бактерий, вирусов, грибов – кишечной палочки, кандиды, гарднереллы, уреаплазмы, цитомегаловируса, герпеса 1-го и 2-го типов и других. Данные патогены могут быть обнаружены даже у тех девушек, у которых не было половых контактов. Они не несут опасность для женского организма и требуют более пристального внимания и лечения только при наличии жалоб.

ВПЧ (вирус папилломы человека) необходимо вынести в отдельную группу, так как данный патоген может вызвать злокачественные изменения в шейке матки и привести к развитию онкологического заболевания. Его тоже можно обнаружить с помощью ПЦР-теста.

ПЦР-анализ показывает наличие разных типов возбудителей, поэтому может назначаться в следующих случаях:

• выделения с неприятным запахом или цветом;
• боли внизу живота;
• выкидыши на разных сроках;
• отсутствие беременности в течение года активной половой жизни;
• нарушение менструального цикла.

ПЦР-диагностика назначается беременным, так как не выявленные своевременно инфекции могут угрожать жизням матери и ребёнка. ПЦР не несёт опасности для женщины и не может спровоцировать выкидыш, однако способна спасти жизнь и здоровье пациентки и плода. Так, например, вирусы герпеса и цитомегаловируса крайне опасны для беременных.

Плюсы и минусы анализа ПЦР

• Достоинством методики является то, что в отличие от культуральных методов исследования, для выявления инфекции не требуется накопления агентов в организме. А в отличие от серологических анализов крови нет необходимости выжидать выработки антител к антигенам бактерий, вирусов, грибов или простейших. От момента заражения можно проводить тестирование. Идеальным можно считать ситуацию, когда интерпретация результатов проводится в день обращения к врачу. ПЦР выигрывает сравнение с ИФА и посевом по всем показателям, кроме одного: способности принимать прошлую инфекцию за настоящую в связи с высокой чувствительностью.
• Погрешности методики, приводящие к ложным результатам, в основном завязаны на неправильный выбор биологических образцов, удаленных от места воспалительных изменений или загрязнением их посторонней инфекцией в процессе забора или транспортировки, нельзя полностью полагаться на диагностику крови. Для половых инфекций предпочтительнее исследовать соскобы урогенитального эпителия.
• Еще одним аспектом становятся погрешности на этапе выполнения лабораторного этапа: старое оборудование, недостаточная квалификация персонала.
• Поэтому всегда предпочтительнее выбирать для исследования клинику с репутацией. Оснащенную современным оборудованием и расходниками и совмещающую в себе консультативный прием специалистов и лабораторные мощности.

Какие анализы и как проводятся

Для проведения анализов на скрытые инфекции применимы такие методы:

• ИФА, что расшифровывается как иммуноферментный анализ. Он позволяет не просто найти возбудителей, но и определить форму инфекции: латентную (скрытую) или активную. По типу иммуноглобулинов, выявляемых анализом, выясняется, сталкивалась ли женщина с инфекцией ранее или заразилась недавно. Антитела M укажут на недавнее заражение и активную фазу, а тип G говорит о том, что заражение произошло ранее, и организм успел выработать специфический иммунитет.
• Полимеразная цепная реакция (общепринятая в медицине аббревиатура – ПЦР). Данный анализ предполагает выявление в биологических материалах (крови или отделяемого из влагалища, уретры, шеечной части матки) инфекционных агентов, а именно их ДНК. Метод отличается достоверностью и высокой точностью, так как даже при ничтожно небольших количествах возбудители обнаруживаются.
• Бактериоскопия. Материал исследуется под микроскопом для выявления провокаторов инфекций. Но данный метод неточен, так как в отобранной порции биоматериала возбудители могут отсутствовать. А при наличии нескольких микроорганизмов их непросто дифференцировать.
• Бактериальный посев. Биоматериал убирается в определённую среду: в созданных условиях выделяются культуры, вызвавшие инфекцию. Также можно сразу определить чувствительность возбудителей к различным активным компонентам антибактериальных медикаментов.

Для исследований, проводимых описанными методами, используются биологические материалы человека, а именно его кровь и отделяемое из уретры или полового органа. И ниже рассматриваются особенности таких анализов.

Анализ крови

Забор крови для последующего исследования осуществляется в утренние часы натощак из вены в сгибе локтя. Накладывается жгут, женщина работает кулаком, потом сжимает его. Лаборант иглой отбирает нужное количество крови, помещает его в пробирку и направляет в лабораторию.

Для достоверности результатов соблюдайте правила подготовки:

1. Отменяются некоторые препараты, к примеру, антибактериальные.
2. За сутки или двое до сдачи анализа исключайте из меню спиртное, а также тяжёлую, жареную, солёную, жирную пищу.
3. Не курите в течение часа-двух до забора крови.

Мазок

Мазок берётся из влагалища, цервикального канала или уретры. Женщина располагается на гинекологическом кресле, врач или лаборант устанавливает расширитель и отбирает выделения с помощью специального шпателя (стерильного). Биоматериал наносится на чистое стекло, направляется в лабораторию. Берётся анализ на 5-7 день менструального цикла, то есть после завершения месячных или спустя 1-3 дня.

К взятию мазка нужно подготовиться, выполняя такие рекомендации:

1. За три-четыре дня до забора биоматериала отказывайтесь от применения гигиенических средств (салфеток, гелей, пенок, растворов для спринцеваний), особенно с антибактериальным эффектом.
2. В течение двух недель до взятия мазка нельзя принимать антибактериальные препараты внутрь, а также использовать местные антибиотические средства в виде вагинальных таблеток или суппозиториев. Применение таких медикаментов повлияет на достоверность анализа, дав ложноотрицательный результат.
3. На протяжении 2-х часов до взятия биоматериала не следует опорожнять мочевой пузырь.
4. За два-три дня до анализа исключайте любые половые акты.